Culture in vitro de l’artichaut « Cynara cardunculus var. scolymus »

Abstract

L‘artichaut (Cynara cardunculus var scolymus L.), plante herbacée de la famille des Asteraceae, est traditionnellement cultivé comme plante maraîchère pour ses capitules. La demande croissante en artichaut rend le développement d‘une méthode rapide de multiplication de cette plante nécessaire. La micropropagation in vitro est une alternative pour l‘obtention de clones uniformes, sains et de haute qualité, nécessaire pour augmenter la surface de culture de cette espèce. Le problème de la contamination et le faible taux de multiplication in vitro de cette espèce restent des facteurs limitants. L'objectif de cette étude est la mise au point d‘un protocole de la culture in vitro de l‘artichaut avec un taux de multiplication élevé afin de l‘appliquer aux cultivars marocains pour une production à grande échelle. Une première approche, visant la mise au point d‘un protocole de germination des graines d‘artichaut, a permis de constater qu‘un prétraitement par incubation à 4 °C suivie par l‘enlèvement des téguments et la mise en culture sur milieu Murashige et Skoog (MS), améliore le pourcentage de germination des deux accessions Art21 et Art22. En revanche, les résultats de la germination dans de la tourbe de variétés IJ et BR ont montré un effet hautement significatif du génotype sur le pourcentage de germination qui a dépassé 50 %, avec un temps de germination peut être réduit à quatre jours après incubation à 18 °C et un traitement par l'acide gibbérellique. Pour la multiplication in vitro, les plantules issues de la germination in vitro des graines de l‘accession Art21 sans tégument à l‘obscurité ont constitué nos explants de départ. Ces plantules, après avoir évolué sur le milieu MS d‘établissement contenant 1 mg/l de l'acide indole 3-butyrique (AIB) et 0,1 mg/l de l‘acide gibbérellique (AG3), ont été décapitées et cultivées sur le milieu de prolifération MS contenant 40 mg/l de l‘adénine sulfate, 50 mg/l du phosphate monosodique, 1 mg/l de la kinétine et 0,1 mg/l de l‘ANA. D‘après les résultats, nous avons constaté que la décapitation de plantules a eu un effet positif sur l'induction des pousses. Le nombre le plus important de pousses régénérées (prolifération des pousses) a été obtenu avec des explants décapités (17 pousses par explant). Le taux de multiplication, obtenu sur douze générations dans ce travail, était 7,56. Ce travail a également porté sur l‘étude de l‘influence de la taille initiale des explants, de la densité des explants et de la durée de culture sur le taux de bourgeonnement et sur la formation des pousses. Les résultats ont montré qu‘une taille de 1-1,5 cm, une densité de quatre explants par 132 cm2 de surface de culture et une durée de génération de quatre semaines sont optimaux quant à la prolifération chez l‘accession Art21. Les pousses développées au cours de la phase de multiplication ont subi plusieurs protocoles d‘enracinement ainsi que d‘acclimatation. Dans notre cas, c‘est le milieu MS modifié, additionné de 2 mg/l de l‘acide naphtalène acétique (ANA) et le charbon actif à 2 g/l qui a donné un pourcentage d‘enracinement de 29,03 % et une qualité acceptable des racines néoformées. Les meilleurs taux d‘enracinement ont été notés chez les pousses qui proviennent d‘un rang de subculture supérieur à 10 et ayant subi une élongation avant d‘entamer l‘étape d‘enracinement. La phase d‘acclimatation reste une phase critique pour notre accession Art21, d‘où la nécessité de soumettre les plantules à d‘autres conditions d‘enracinement et d‘acclimatation afin d‘améliorer le pourcentage de survie des vitroplants et de valoriser les résultats déjà obtenus en phase de multiplication. Par ailleurs, un protocole de cryoconservation fondé sur la vitrification a été appliqué aux deux variétés italiennes d‘artichaut (Grato et Campagnano), d‘après les premiers résultats, nous avons noté que le milieu MS modifié 0,3M est le plus convenable pour ces deux variétés d‘artichaut. Ce protocole constitue un point de départ vers une application de la cryoconservation pour la protection et la conservation de germoplasmes d‘artichaut.