Nouveaux supports porteurs de β cyclopextrine et d'amidines pour l'HPLC

Abstract

Les supports chromatographiques d’enrobage "coating supports" ont connu ces dernières années un essor considérable. Dans le but d’apporter notre contribution au développement de ce type de phases stationnaires, nous avons préparé deux familles de supports à base de silice passivée à la polyvinylamine, greffée par la β cyclodextrine ou par une amidine (paraaminobenzamidine ou L-arginine). Les phases stationnaires fonctionnalisées par la β cyclodextrine dont le mécanisme de séparation est basé sur la formation de complexes d’inclusion plus ou moins stables entre la cyclodextrine et les solutés, nous ont permis de séparer les isomères méta-, ortho- et paranitrophénol. L’influence de la proportion et de la nature de la phase organique, ainsi que la longueur de la colonne sur la séparation, ont été étudiées. Par ailleurs, nous avons été amenés à réticuler le polymère enrobant pour éviter sa désorption au cours du temps, assurant ainsi une meilleure stabilité des colonnes. L’étude par méthode statique "batch method" des interactions de la trypsine avec les supports porteurs d’amidines a permis de mettre en évidence des adsorptions spécifiques et non spécifiques de cette sérine-protéase sur cette famille de phases stationnaires.