Une nouvelle approche pour caractériser le venin de scorpion noir « Androctonus mauretanicus mauretanicus »

Abstract

Les venins de scorpion sont des mélanges complexes de protéines qui, chacune possèdent une action biologique très spécifique. Ils contiennent des enzymes à actions lytique, des molécules participant à des réactions allergiques et en priorité des neurotoxines, molécules perturbant la conduction du message nerveux. Les neurotoxines sont douées d’une importante activité pharmacologique aussi bien vis-à-vis des canaux Na+ voltage-activités des membranes des cellules molécules d’un PM d’environ 7000 Da au sein duquel on trouve des α et β des toxines définies selon leurs fixations sur les sites 3 ou 4 du canal Na+ voltage-activé. Le second groupe possède des toxines avec un PM d’environ 4000 Da. Ce sont des neurotoxines bloquant les canaux K+ activés par le Ca2+ ou par le voltage ainsi d’autres modulant les canaux CI- et Ca2+. Dans le but de caractériser les peptides du venin de scorpion noir Amm Androctonus mauretanicus mauretanicus, nous avons utilisé les anti-sérums produits contre les principales toxines létales pour le mammifère trouvées dans les venins de scorpion de nouveau et de l’ancien monde. Ce dépistage immunologique a été suivi par des tests de toxicité chez la souris et une analyse par spectrométrie de masse (MALDI-TOF). Ceux-ci nous ont permis de fournir des informations sur la composition et la nature moléculaire de ce venin. Pour caractériser des nouveaux composés, le venin de scorpion Amm a été fractionné par la filtration moléculaire sur le gel Séphadex G-50. Les fractions toxiques (F5-F8) ont été analysées premièrement par HPLC, pis par spectrométrie de masse MALDI-TOF off-line permettant d’établir une carte peptidique des toxines du venin de scorpion Amm. Les masses moléculaires des F5 et F6 sont majoritairement entre 6500 et 7500 Da et correspondent à des toxines longues modulant les canaux Na+ potentiel dépendant. Les masses moléculaires des fractions toxiques (F7 et F8) sont comprises entre 2500 et 5000 D et correspondent à des toxines courtes bloquant les canaux K+. D’autres peptides non caractérisés jusqu’à maintenant ont été mis en évidence. Selon les données immunologiques obtenues, le venin Amm contient plusieurs toxines qui présentent des réactions croisées contre les principales toxines les plus létales trouvées dans les venins des scorpions de l’Afrique du Nord, mais aucune réaction positive n’a été observée avec les sérums préparés contre les toxines purifiées des venins d’Amérique du Nord et du Sud. Cependant, pour l’AaHIT, toxine trouvée dans le venin d’Androctonus australis hector (scorpion trouvé en Algérie et en Tunisie), une réaction positive a été trouvée dans la F5 avec le sérum anti-AaHTI. Ceci est en faveur d’une similitude de séquence entre l’AaHTI et une toxine anti-insecte purifié dans le venin de scorpion Amm. Selon les donnes immunologiques obtenues, le venin d’Amm, contient plusieurs toxines qui présentent des réactions croisées contre les principales toxines les plus létales trouvées dans les venins des différents scorpions de l’Afrique du Nord, mais une faible réaction positive a été observée avec les sérums préparés contre les toxines purifiées des venins d’Amérique du Nord et du Sud. Certaines toxines déjà décrites peuvent être identifiées en combinant des tests d’immunologie et de toxicité avec els étude de masse par SM-MALDI-TOF. Parmi ces toxines, nous avons pu identifier et séquencer la toxine Amm III qui montre une légère réaction croisée avec la toxine Aah I du venin de scorpion Androctonus australis.