Propriétés immunologiques des antigènes de deux parasites intestinaux ( Nippostrogylus brasiliensis "nématode" et Eimeria falciformis "protozoaire" : Rôle des antigènes de surfaces dans l'induction de l'immunité protectrice de la souris

Abstract

Le nématode Nippostrongylus brasiliensis est un parasite de rat se développant au contact intime de la muqueuse intestinale ; les vers adultes sont responsables de l’induction d’une résistance immunitaire dont les principaux mécanismes se déroulent localement. Au cours des études immunochimiques effectuées sur l’extrait total des vers adultes une hétérogénité antigénique très importante a été mise en évidence à l’aide d’anticorps de lapin immunisé ou de sérum hyperimmum (SHI) de rat, parmi ces antigènes 5 enzymes ont pu être caractérisés. Les protéines de cet extrait séparées par électrophorèse en gel d’agarose-SDS ou obtenues par fractionnement par immunoadsorption, ont été testées pour leur capacité à induire une stimulation de la prolifération des cellules provenant de ganglions mésentériques de souris infestées. Les résultats révèlent le caractère fortement antigénique des protéines de faible PM ; nous avons concentré nos efforts sur les protéines les plus actives appelées Ag7b, reconnues à la fois par les lymphocytes en culture et le SHI. L’utilisation dans une seconde étape des exoantigènes isolés du même stade du parasite nous a permis de progresser rapidement vers l’obtention d’antigène candidat vaccin potentiel. Le s10 protéines de ce mélange antigénique stimule aussi la transformation lymphoblastique. La restimulation in vitro des cellules immunes pendant un temps court en présence d’une faible dose d’exoantigène leur permet d’acquérir rapidement une capacité protectrice révélée par le transfert de l’immunité adoptive chez des souris saines. L’immunisation de souris par ces exoantigènes enrobés dans les liposomes administrés d’une façon répétée les jours – 19, 17, et – 15 avant l’infestation par voie intragastrique induit une immunité protectrice à 93%. Une faible dose (60 *g) suffit pour induire cette protection qui persiste au moins 73 jours après l’immunisation. Ce protocole d’immunisation stimule la synthèse d’anticorps au niveau sérique et au niveau de la muqueuse intestinale (IgA). Des anticorps de lapin dirigés contre l’Ag7b défini plus haut ont permis l’isolement à partir des exoantigène et en une seule étape d’une fraction composée de 2 protéines (P43, P14) conservant l’activité protectrice. L’obtention à l’état purifié de ces protecteurs est la protéine P43 : glycoprotéine présente à la surface du parasite et antigène commun au stade adulte et au stade larvaire. Des expériences de transfert de l’immunité adoptive après restimulation in vitro par la P43, montrent que les cellules T jouent un rôle important dans le rejet du parasite. Ce protocole d’immunisation au niveau local a été transposé chez la souris contre un autre parasite, la coccidie Eimeria falciformis ; les antigènes de surface du stade sporozoïde (7 protéines) incorporées dans liposomes induisent une immunité protectrice.