Etude génétique de l'hypercholestérolémie familiale au Maroc : Hétérogénéité mutationnelle et variabilité phénotypique

Abstract

L’hypercholestérolémie familiale (HF) occupe une place primordiale parmi les facteurs de risques de l’athérosclérose. C’est un maladie autosomique dominante caractérisée par une augmentation isolée de cholestérol total (CT) et de cholestérol-LDL (C-LDL). Elle est principalement due à des mutations au niveau des gènes du récepteur LDL (LDLR), de l’apolipoprotéine B, et de PCSK9. L’HF peut être associée à une hypoalphalipoprotéinémie (HALP) caractérisée par des taux plasmatiques bas de cholestérol-HDL (C-HDL) et d’apolipoprotéine A-I (apo A-I). ce phénotype pourrait être dû à des mutations au niveau des gènes codant pour des protéines ou enzymes impliquées dans le métabolisme des HDL, comme l’apo A-I , la LCAT (Lécithine Cholestérol Acyle Transférase), la LPL (Lipoprotéine lipase), et d’autres comme le gène de la β-glucocérébrosidase. Les objectifs de ce travail étaient la recherche des mutations responsables de l’HF au niveau du gène LDLR, la recherche de la présence de la mutation R3500Q au niveau du gène de l’apo B pour exclure son implication dans le phénotype HF des patients étudiés, la détermination du génotype de l’apo E pour chaque sujet, et enfin, la recherche de la cause génétique de l’HAPL sévère observée chez un famille HF soufrant des deux dyslipidémies. Pour cela, nous avons recruté 5 proposants marocains non apparentés et 30 membres de leurs familles, chez lesquels nous avons déterminé les paramètres lipidiques, à savoir, le CT, les triglycérides, le C-HDL et le C-LDL. Nous avons recherché la mutation R3500Q au niveau du gène de l’apo B et nous avons déterminé le génotype de l’apo E par PCR-digestion enzymatique. Nous avons procédé à l’analyse du gène LDLR par PCR-SSCP puis séquençage des fragments présentant un profil SSCP modifié pour identifier les mutations détectées. 56 sujets sains ont été utilisés comme groupe contrôle. Aussi, nous avons analysé les gènes de l’apo A-I et de la LCAT par SSCP suivie de séquençage automatique. Le gène de la LPL a été analysé par séquençage direct. De plus, nous avons recherché les mutations les plus fréquentes au niveau du gène de la β- glucocérébrosidase : N370S et L444P par PCR-digestion enzymatique. Les résultats de ces analyses ont montrés qu’aucun des sujets n’est porteur de la mutation R3500Q, et que tous les sujets analysés ont le génotype E3/E3 pour le gène de l’apo E, sauf 3 sujets qui ont le génotype E3/E4. Concernant la cause génétique de l’HF, nous avons identifié au niveau du gène LDLR, 5 mutations ponctuelles (C25X, C113R, G266C, P664L et C690S) et une délétion de 7 pb (756del17). Cette délétion ainsi que les mutations C25X, G266C sont nouvelles, jamais décrites dans les autres populations. Aussi, au niveau du même gène, nous avons identifié 7 polymorphismes, C6C, A370T, L554L, N570N, V632V, R450R et R723R, n’ayant aucun impact sur la cholestérolémie. Pour la famille souffrant de l’HF associée à l’HALP, nous avons identifié une mutation intronique, 2147 c>A ou IVs3-23 C>A, à -22 pb du site accepteur de l’intron 3 du gène LCAT. En plus, nous avons identifié 3 mutations silencieuses, V108V, E118E et T361T au niveau du gène de la LPL. Cette étude nous a apporté des informations importantes sur les bases moléculaires de l’HF dans l’échantillon étudié. Au niveau du gène LDLR , nous avons caractérisé des mutations d écrites dans d’autres populations et nouvelles, responsables de l’HF chez les familles étudiées, tout en montrant une hétérogénéité mutationnelle et une variabilité dans l’expression de la maladie. Cependant, il est indispensable d’élargir cette étude à l’échelle nationale et de lancer d’autres axes de recherche contribuant à l’étude de l’hétérogénéité génétique de l’HF et de l’effet d’autres facteurs génétiques et/ou environnementaux sur la variabilité phénotype de la maladie dans la population marocaine. Concernant l’HALP, la mutation IVS3-23 C>A pourrait contribuer à cette dyslipidémie, d’autres facteurs génétiques et/ou environnementaux. Les recherches se poursuivent pour identifier les causes précises de cette HALP.