Mise au point de la technique PCR RFLP pour la recherche de la mutation G182A dans le glaucome congénital primaire

Abstract

Le glaucome congénital primitif (GCP) est une forme rare et grave de glaucome, qui constitue l’une des principales causes de cécité chez les enfants. Dans les formes héréditaires, le GCP est transmis généralement selon le mode autosomique récessif et se caractérise par une hétérogénéité en termes de phénotype et de génotype. Plusieurs gènes ont été associés au GCP particulièrement le gène CYP1B1 qui explique une bonne partie des cas de GCP. La mutation G182A (p.G61E) au niveau de ce gène est récurrente dans les populations du Moyen-Orient où les mariages consanguins sont courants. Ainsi, l’identification des mutations du gène CYP1B1 via des approches moléculaires est d’une importance cruciale dans le milieu clinique pour un diagnostic précoce du GCP ainsi qu’une prise en charge et un conseil génétique adaptés. L'objectif de la présente étude, réalisée au sein du laboratoire de génétique médicale du CHU Ibn Rochd, était de mettre au point une technique permettant de détecter la mutation récurrente G182A du gène CYP1B1 chez les patients marocains atteints de GCP, en se basant sur l’utilisation d’une paire d’amorces et une enzyme de restriction choisies à l’aide des outils bio- informatiques, ainsi que l’application du protocole établi sur deux cas atteints du GCP. Ainsi, nous avons pu développer un protocole PCR-RFLP simple, peu coûteux et ne nécessitant qu’un équipement de biologie moléculaire de base pour le génotypage précis de la mutation G182A. Par ailleurs, une validation de ce protocole serait nécessaire ce qui permettra de rechercher la mutation chez une large cohorte de patients atteints de GCP et d’évaluer son implication et sa distribution au sein de la population marocaine.