Expression et exposition à la surface d'E.coli de lipoprotéines membranaires hétérologues fixatrices des métaux lourds

Abstract

Le présent travail est constitué de deux parties : La première partie concerne le clonage et l’analyse de la structure du gène de la lipoprotéine majeure Oprl de la membrane externe de Pseudomonas aeruginosa. L’analyse de la séquence en acides aminés de la lipoprotéine Oprl, déduite du gène, a montré qu’elle présente des analogies avec les séquences des lipoprotéines clonées à partir de gènes d’autres espèces. La lipoprotéine Oprl s’est révélée utile pour être le support, à la surface bactérienne, de peptides pouvant accomplir différents rôles. La deuxième partie de ce travail concerne la construction, à partir du gène de la lipoprotéine Oprl, de gènes chimères qui codent pour des lipoprotéines hétérologues ayant à l’extérieur N-terminal la lipoprotéine Oprl et à l’extrémité C-terminal des motifs peptiques constitués d’histididnes et de cystéines, acides aminés connus pour leur capacité à fixer les métaux lourds. Les différentes analyses réalisées ont montré que les lipoprotéines hétérologues codées par les plasmides contenant les gènes chimères construits, s’expriment chez E.coli et s’exposent à la surface externe de la bactérie. En plus, ces lipoprotéines permettent à la bactérie de fixer les métaux lourds présents dans le milieu.