Structure et régulation de l'expression des gènes actine dans des cellules de Drosophila melanogaster en culture

Abstract

La 20-hydroxyyexdsone, hormone de mue des insectes, contrôle leur développement et leur métamorphose. Dans les cellules en culture de Drosophila melanogaster (Kc), cette hormone induit des réponses pleistropiques et notamment une augmentation du taux de la protéine actine. Celle-ci est codée par une famille multigénique de 6 membres dont la séquence codante est très conservée. Cependant les régions 5’ et 3’ transcrites et non traduites sont spécifiques de chaque gène. Cinq gènes actine ont été isolés à partir d’une banque génomique de Drosophila melanogaster. Quatre d’entre eux ont été étudiés (5C, 42A, 88F et 57 A). Des fragments de restriction dans les régions 5’ et 3’ transcrites et non traduites ont été clonés et utilisés comme sondes spécifiques. L’hybridation de ces ondes avec les ARN polyA⁺ de cellules Kc traités ou non à la 20-He a permis de montrer que seuls les gènes actine 5C et 42A sont exprimés dans les cellules Kc et que le taux de leurs ARN correspondants augmente en fonction du temps de traitement à la 20-hydroxyecdsone. Des expériences de transcription in vitro dans les noyaux isolés ont permis de montrer que cette augmentation est due, au moins en partie, à une augmentation du taux de transcription des deux gènes. Les techniques de nucléase SI et d’extension d’amorce ont permis de localiser un intron en 5’ des gènes actine 5C et 42A.