Immunonéphélémétrie sur supports microparticulaires - Modélisation de systèmes de dosages -

Abstract

L’immunologie quantifie la lumière dispersée par des complexes immuns Ag/Ac en suspension dans un milieu liquide. L’amplification artificielle de la taille des précipités Ag/Ac par la fixation de l’un ou l’autre des partenaires de la réaction sur des microparticules elles mêmes susceptibles de disperser la lumière (MS) fait de cette technique l’immunonéphélémétrie à supports microparticulaires. Ce procédé cumule des avantages pratiques indéniables de simplicité, de rapidité, de sensibilité, de reproductibilité, de précision et d’adaptabilité. Notre travail a pour objectif de développer, par cette technique, différents modèles de dosages d’hGG, susceptibles d’être transposés à d’autres molécules biologiques, et en particulier aux autres hormones glycoprotéïques (TSH, LH et FSH) de structure voisine. Le système de détection/dosage sont exposés. Ils sont fondés sur des réaction directes ou d’inhibition, simples ou amplifiées, mettent en œuvre des Ac polyclonaux, ou plus souvent des Acm anti hGG complémentaires ou non, libres ou fixés sur microsphère (MS), seuls ou en mélange, mis à réagir avec de l’hGG monomère libre ou couplée sur MS, pure ou associée à de l’HSA. Des conclusions d’ordre technologiques, pratique et d’autres plus fondamentales ont pu être émises : - le seuil de détection atteint 4 uUI/ml de milieu de dosage. - Le passage en milieu biologique et l’extrapolation des modèles de dosage, développés à l’aide d’hGG, à d’autres hormones glycoprotéïques n’a pas posé de problèmes insurmontables. - en milieu immunonéphélémétrie microparticulaire, l’affinité et la complémentarité des Acm sont des paramètres d’autant plus importants qu’ils peuvent être modifiés selon que l’Acm ou l’Ag est libre ou fixé sur les MS.