Rôle de la méthylation des séquences GATC dans le fonctionnement de l'origine de réplication d'E.coli (ori C) : (Réplication in vitro de plasmides ori C.)

Abstract

La méthylation des séquences GATC par la dam méthylase in vivo et in vitro augmente l’efficacité de la réplication d’un plasmide contenant la région oriC par un système acellulaire dépendant de la protéine dnaA. Celle-ci purifiée, possède une affinité moindre pour les fragments oriC non méthylés. La méthylation des séquences GATC de oriC favorise la protection par la protéine dnaA des fragments oriC contre la DN ase I (analysées par la technique du foot printing). Ces résultats suggèrent que les groupements mèthyls des séquences GATC seraient les signaux de reconnaissance pour la protéine dnaA au niveau de oriC. Ceci nous amène à proposer un modèle dans lequel l’état transitoire hémi-méthylè de oriC après l’initiation empêcherait les réinitiations prématurées. L’état de méthylation des séquences GATC de oriC serait alors un niveau de régulation du cycle cellulaire.