Etude de l'organisation, l'expression et l'édition des ARNs "RNA editing" de gènes mitochondriaux de blé fertile et mâle-stérile cytoplasmique : Cas du gène de l'apocytochrome b (cob) du complexe III de la chaîne respiratoire et des gènes des sous-unités de l'ATPase mitochondriale

Abstract

Nous avons étudié l’organisation et l’expression du génome mitochondrial d’une lignée de blé alloplasmique (T. aestivum cytoplasme T.timopheevi) présentant le trait de la stérilité mâle cytoplasmique (SMC). Le gène cob codant pour l’apocytochrome b a été étudié ; deux formes (A et B) ont pu être mises en évidence ; elles diffèrent par la séquence en aval de la région codante. L’analyse des ARNm mitochondriaux montre l’hybridation de deux transcrits correspondant à la forme A du gène cob. La protéine prédite de la forme A du gène est plus longue de 26 acides aminés que celle décritz chez le blé T.aestivum.. Des séquences putatives régulation de l’expression ont été déterminées. L’analyse des séquences d’ADNc des transcrits du gène cob montre que le processus de modification post-transcriptionnelle appelé "RNA editing", consiste à des conversions de C en U principalement, entraîne le changement de 18 acides aminés chez la lignée SMC n’ont pas révélé la présence de molécules éditées. L’utilisation de l’immonodétection a montré que la partie carboxylique de l’apocytochrome b correspond aux 26 acides supplémentaires chez la lignée SMC subie une maturation post-traductionnelle. L’analyse de séquence des ADNc des gènes des différentes sous-unités de l’ATPase (atp6, atp9, atpB et atpA) chez les différentes lignées de blé a révélé quelles régions codantes sont modifiées par des conversions de C en U induisant des changements d’acides aminés et la création de codons stop. Des essais de purification des différentes sous-unités ont été entrepris. La détection immunologique en utilisant des anticorps spécifiques des peptides issus des formes non éditées a révélé que les ARN non édités ne sont pas traduits. Une étude physiologique a été entreprise en suivant la respiration chez les différentes lignées de blé.