Identification de nouveaux autoantigènes centromériques et développement d'un Array pour le diagnostic de la sclérodermie

Abstract

La sclérodermie est une maladie auto-immune caractérisée par la présence des autoanticorps antinucléaires (ANA) produits contre différents structures et composants cellulaires comme l‟ADN, les histones et les protéines centromériques. Les anticorps anti-centromère et spécifiquement contre l‟antigène CENPB, sont utilisés comme marqueur dans le diagnostic clinique de la sclérodermie. Le centromère des chromosomes humains est une structure dans laquelle on a identifié plus de 80 protéines dont certaines ont été décrites comme des autoantigènes centromériques dans certaines maladies comme la sclérodermie. Au niveau cellulaire le centromère assure l‟union des chromosomes aux microtubules du fuseau mitotique pour diriger la ségrégation des chromosomes pendant la division cellulaire. Lors de notre travail, nous avons exprimé dans un système bactérien, différentes protéines centromériques comme CENPI, CENPH, CENPK, CENPM et CENPP. En utilisant des techniques d‟immunofluorescence (IF) et de western blot nous avons démontré que dans différents patients atteints de sclérodermie les sérums de ces derniers présentent une réaction auto-immune non seulement contre l‟autoantigène majoritaire CENPB mais aussi contre les autoantigènes CENPI, CENPH, CENPK, CENPM, CENPP. Nos résultats suggèrent aussi une corrélation possible entre la production de l‟autoanticorps anti-CENPI et la présence d‟une cirrhose biliaire primaire. De nos jours on ne dispose pas d‟un traitement définitif de la sclérodermie, la plupart des traitements sont proposés en fonction des manifestations cliniques et des pathologies possibles observées chez chaque patient. L‟application de meilleures thérapies peut être atteinte si on arrive à identifier le spectre des auto-anticorps et les différents profils qui en résultent chez chaque patient. Pour cela nous avons consacré d‟abord une grande partie de notre travail à l‟identification de nouveaux autoantigènes dans la sclérodermie et postérieurement à développer un système de puces à autoantigènes centromériques qui pourraient avoir un rôle très important dans le diagnostic et le pronostic de la maladie. Ce système d‟analyse nous permet d‟identifier à partir de plusieurs sérums humains à la fois, avec une grande précision, spécificité et reproductibilité, la présence des autoanticorps anti Nt-CENPB, Ct-CENPB, et Nt-CENPI.